R50-630A 規格:100ml 價格/元:430">
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RIPA裂解液是最可靠的緩沖液之一,其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,該緩沖液能夠從細胞質,膜和核蛋白質中提取蛋白質,并且與許 多應用相容,包括蛋白質分析,和蛋白質純化。RIPA緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶,如果需要,可將酶添加到試劑中以防止蛋白質水解并維持蛋白質 的磷酸化狀態。一些蛋白激酶和其他酶可能對RIPA緩沖液的組分敏感,導致其活性降低。 在這種情況下,準備不含脫氧膽酸鈉和SDS的RIPA緩沖液。
注意事項:
1.抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
2.裂解得到的蛋白樣品,含有較高濃度的去垢劑,不建議用Bradford 法測定蛋白濃度,可以選用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。
3.裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物,屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續實驗;如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續實驗。如果檢測一些常見的轉錄因子,例如NFKB、p53等時,通常不必進行超聲處理,就可以檢測到這些轉錄因子。